Возбудитель туберкулеза:его устойчивость, генетика микобактерий

Туберкулез был и по-прежнему остается одной из глобальных медицинских и социально-экономических проблем многих стран мира. По данным ВОЗ ежегодно более 3 млн человек в мире умирают от туберкулеза, в России эпидемическая ситуация по туберкулезу также остается напряженной.

А Приморский край традиционно занимает высокие  позиции по всем эпидемиологическим показателям. Так, показатель заболеваемости туберкулезом за период  2001 – 2013 гг. в нашем регионе увеличился в 1,5 раза и составил 207,9 на 100 тысяч населения, что превысило общероссийский в 2,5 раза.

В 2013 году заболеваемость в регионе снизилась до 148,4 на 100 тысяч населения, превысив средний показатель по РФ в 2,3 раза.

Заболеваемость туберкулезом на 100 тысяч населения в Приморском крае и Российской Федерации за период с 2000-2013 г.г.

Коварная МЛУ

В данном материале заведующая лабораторным отделением ГБУЗ «ПКПД», врач – бактериолог Елена Димова представляет совместное исследование с заведующей кафедрой микробиологии, вирусологии факультета общественного здоровья ТГМУ, д.м.н., профессором Валентиной Шарковой, и аспирантом кафедры врачем – бактериологом Пивоваровой Е.В.

— Особую тревогу вызывает рост заболеваемости туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ), лечение которого оказывается малоэффективным и дорогостоящим — подчеркивает Елена Димова.

— Серьезное внимание уделяется изучению распространения туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью, когда возбудитель устойчив к двум основным противотуберкулезным препаратам – изониазиду и рифампицину. Возникновение случаев МЛУ туберкулеза оказывают значительное влияние на распространение туберкулеза.

В Приморском крае отмечаются высокие показатели распространенности туберкулеза с МЛУ на 100 тысяч населения, превышающие общероссийские в 1,5 раза.

По словам специалиста, на сегодняшний день проводятся исследования, которые предполагают связь между распространением более тяжелых и распространенных  поражений легочной ткани, характеризующихся выраженными симптомами интоксикации и прогрессирующим течением и формированием  лекарственной устойчивости возбудителя с трансмиссией микобактерий туберкулеза  генотипа Beijing.

— Однако существуют  и  другие работы, в которых не усматривается подобной взаимосвязи, — уточняет Елена Владимировна.

—  Проведенные рядом авторов исследования проводят корреляцию между высокой   жизнеспособностью штаммов микобактерий туберкулеза генотипа Beijing и мутациями в гене katG (замена 315 AGC-ACC; Ser-Thr), определяющими устойчивость к изониазиду и в гене rpoB (замена 531 TCG-TTG, Ser-Leu), кодирующими устойчивость к рифампицину.  Для штаммов микобактерий туберкулеза, принадлежащих к филогенетическому семейству Beijing и обладающих множественной лекарственной устойчивостью, характерно наличие обеих этих мутаций.     

Целью данного исследования было изучение генотипов штаммов микобактерий туберкулеза, циркулирующих на территории Приморского края и выявление корреляции между генотипом, тяжестью заболевания и  лекарственной устойчивостью.

Материалы и методы

Так, проведено генотипирование штаммов МБТ, полученных от больных туберкулезом органов дыхания из числа впервые выявленных пациентов и пациентов с рецидивом заболевания, поступивших на лечение в Приморский противотуберкулезный диспансер в 2009-2010 г.г. пациентов. 

— Выделение ДНК, определение мутаций, генотипирование микобактерий туберкулеза на принадлежность к филогенетическому семейству Beijing было проведено в нашем диспансере методом ПЦР в реальном времени  на аппарате АНК-32   с использованием тест-систем производства ЗАО «Синтол», (Россия), — отмечает Елена Димова. — Штаммы МБТ, используемые для генотипирования, были культивированы с помощью автоматического анализатора   ВАСТЕС MGIT – 960, который внедрен с высокой эффективностью в работу бактериологической лаборатории ГБУЗ ПКПД  с 2008 года. Многолетний опыт использования автоматизированной системы показал увеличение частоты выделения культуры МБТ и сокращение сроков исследования. Это сделано в целях повышения эффективности лечения и снижения риска возникновения лекарственной устойчивости, на основании приказа МЗ РФ от 21 марта 2003года «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в РФ».

Результаты исследований и обсуждение полученных результатов

В результате проведенных исследований из 170 образцов 109 (64,1%) принадлежали к генотипу Beijing, 61 (35,8%) и отнесены к другим (не-Beijing) генотипам.

Доля генотипа Beijing в общей циркуляции штаммов M.tuberculosis, выделенных от больных туберкулезом органов дыхания  на территории Приморского края.

Отношение к противотуберкулезным препаратам первого ряда были изучены с помощью молекулярно-генетических методов. В результате исследования 78 (45,3%) штаммов обладали чувствительностью к препаратам, полирезистентность была выявлена у 48 (27,9%) штаммов, множественная лекарственная устойчивость была выявлена в 46 (26,7%) случаях, 

при этом, среди штаммов с сохраненной чувствительностью генотипы распределились следующим образом: 64,1%, (p

Возбудитель туберкулеза, строение, изменчивость микобактерий

Возбудители туберкулеза — кислотоустойчивые микобактерии, открытые Р. Кохом в 1882 г.

Известно несколько видов микобактерии туберкулеза: Mycobacterium tuberculosis (человеческий вид), Mycobacterium africanum (промежуточный вид) и Mycobacterium bovis (бычий вид), которые относятся к роду Mycobacterium, семейству Mycobacteriacae, порядку Actinomycetalis.

Возбудителями туберкулеза у человека наиболее часто (в 92% случаев) являются микобактерии туберкулеза человеческого вида, микобактерии бычьего и промежуточного видов вызывают развитие туберкулеза у человека соответственно в 5 и 3% случаев.

В современной микробиологической классификации микобактерии птичьего вида (М. avium) относят к нетуберкулезным микобактериям комплекса avium — intracellular, которые могут быть возбудителями микобактериоза у человека и животных.

Микобактерии туберкулеза

Микобактерии туберкулеза — тонкие, прямые или незначительно изогнутые палочки длиной 1 —10 (чаще 1—4) мкм, шириной 0,2—0,6 мкм, гомогенные или зернистые со слегка закругленными концами (рис 1,1), Они неподвижны, не образуют эндоспор, конидий и капсул.

Морфология и размеры бактериальных клеток значительно колеблются, что зависит от возраста клеток и особенно от условий существования и состава питательной среды.

С помощью электронной микроскопии выделены основные структурные элементы микобактерии туберкулеза: клеточная стенка, цитоплазматическая мембрана и ее производное — мезосома, цитоплазма, ядерное вещество — нуклеотид.

Клеточная стенка ограничивает клетку снаружи, обеспечивая механическую и осмотическую защиту. Электронно-микроскопически в клеточной стенке выделяют три слоя толщиной по 10 нм, поверхностный — микрокапсула — состоит из полисахаридов и играет важную роль в жизнедеятельности микобактерии, в том числе обеспечивает их устойчивость к неблагоприятным воздействиям. В клеточной стенке находятся видоспецифические антигены. Вакцины, приготовленные из клеточных стенок туберкулезных микобактерии, имеют разные вирулентность и иммуногенность. Наиболее выраженный иммунитет вызывают вакцины из клеточных стенок высоковирулентных микобатерий. Клеточные стенки вызывают в организме здоровых животных развитие повышенной чувствительности замедленного типа (ПЧЗТ), антителообразование. Однако их сильные сенсибилизирующие свойства и наличие в них токсического кордфактора (фактора вирулентности) значительно осложняют гипериммунизацию этой фракцией микобактерии туберкулеза. [Авербах М. М. и др., 1976; Романова Р. Ю., 1981]

Задача заключается в выделении из фракций клеточных стенок компонентов, обладающих высокой протективной активностью.

Согласно современным представлениям, в состав цитоплазматической мембраны, расположенной под клеточной стенкой, входят липопротеидные комплексы. С ней связаны различные ферментные системы, в частности окислительно-восстановительные.

В цитоплазматической мембране осуществляются процессы, ответственные за специфичность реакций микобактериальной клетки на окружающую среду.

Цитоплазматическая мембрана микобактерий туберкулеза путем инвагинации в цитоплазму формирует внутрицитоплазматическую мембранную систему, или мезосому. Мезосомы полифункциональны.

С ними связана локализация многих ферментных систем, они участвуют в синтезе материала клеточной стенки, выполняют роль посредника между ядром и цитоплазмой. Отмечено слабое развитие или отсутствие мезосом у авирулентных штаммов микобактерий туберкулеза и их L-форм [Кац Л. Н., Волк A.B., 1974].

Цитоплазма микобактерий туберкулеза состоит из гранул и вакуолей различной величины. Основная часть мелкогранулярных включений представлена рибосомами, на которых синтезируется специфический белок.

Установлено, что носителем генетической информации бактерий являются не только хромосомы, но и в нехромосомные элементы — плазмиды. Основное различие между хромосомами и плазмидами заключается в их размерах. Хромосома во много раз крупнее плазмиды и соответственно несет большое количество генетической информации.

Возможно взаимодействие плазмид с хромосомой. Плазмиды благодаря малому размеру хорошо приспособлены к переносу из клетки в клетку. Исследования плазмид имеют не только теоретическое, но и практическое значение. Существует мнение, что гены устойчивости микобактерий туберкулеза к химиопрепаратам локализованы как на хромосоме, так и на плазмиде.

[Konny М., ParentiF., 1980]

Описаны многочисленные морфологические варианты микобактерий: гигантские формы с колбовидно утолщенными разветвлениями, нитевидные, мицелиеподобные и булавовидные, дифтероидные и актиномикотические формы. Микобактерий туберкулеза могут быть длиннее или короче, толще или тоньше обычных, гомогенны или зернисты. Иногда они представляют собой цепочки или отдельные скопления кокковидных зерен.

Явление изменчивости микобактерий туберкулеза было обнаружено вскоре после их открытия. Уже в 1888 г. И. И.

Мечников сообщил, что в культурах, кроме типичных палочек Коха, встречаются полиморфные формы этих микроорганизмов в виде коротких, соединенных попарно звеньев и гигантских образований с колбовидными разветвлениями.

Первое сообщение о возможности существования у микобактерий туберкулеза фильтрующихся форм относится к 1910 г. (A.Fontes).

При химиотерапии экспериментального деструктивного туберкулеза, а также после ее прекращения в гомогенатах из стенки каверны, пропускаемых через бактериальные фильтры с размером пор 0,2 мкм, были обнаружены очень мелкие, с упрощенной структурой формы возбудителя туберкулеза, названные ультрамелкими. Затем было показано, что эти формы путем многократных биологических пассажей способны реверсировать в классическую палочковидную форму [Хоменко А.Г. и др., 1982, 1989]. Одним из видов изменчивости многих бактерий является образование Ь-форм. Доказана способность к образованию Ь-форм и у микобактерий туберкулеза. [Дорожкова И.Р., 1974; Шмелев Н.А., Земскова З.С., 1974]При этом было обнаружено, что трансформация микобактерий в b-формы усиливается под влиянием противотуберкулезных препаратов. В мокроте «абациллярных» больных с деструктивными формами туберкулеза могут находиться b-формы микобактерий, способные длительно пребывать в организме и в дальнейшем при соответствующих условиях реверсировать в палочковидный вариант. [ХоменкоА. Г. и др., 1980]

Следовательно, абациллирование каверн таких больных еще не означает их стерилизации в отношении микобактерий туберкулеза.

Наряду с морфологической изменчивостью микобактериям туберкулеза свойственна широкая изменчивость и других признаков, в частности кислотоустойчивости.

Последняя проявляется способностью сохранять окраску даже при интенсивном обесцвечивании кислым спиртом и является характерной особенностью всех видов микобактерий, обусловленной высоким содержанием в них миколовой кислоты и липидов.

Частичная или полная утрата кислотоустойчивости ведет к образованию смешанной, состоящей из кислотоустойчивых и некислотоустойчивых особей, или полностью некислотоустойчивой популяции.

Микобактерии туберкулеза весьма устойчивы к воздействию факторов окружающей среды.

В естественных условиях при отсутствии солнечного света их жизнеспособность может сохраняться в течение нескольких месяцев, при рассеянном свете возбудители погибают через 1—мес.

В уличной пыли микобактерии туберкулеза сохраняются до 10 дней, на страницах книг — до 3 мес, в воде — до 5 мес В то же время облученная солнечным светом культура микроорганизмов погибает в течение ч, а под воздействием ультрафиолетовых лучей — через 2—3 мин.

Микобактерии туберкулеза считаются аэробами, хотя имеются сведения, что некоторые их виды можно рассматривать как факультативные анаэробы.

Размножаются эти микобактерии очень медленно (одно деление клетки происходит за 14—18 ч).

Микроскопически видимый рост микроколоний, культивируемых на жидких средах при температуре 37°С, выявляется на 5—7-е сутки, видимый рост колоний на плотных средах, культивируемых при той же температуре, — на 14—20-е сутки.

Для нормального развития микобактерии туберкулеза требуются специальные питательные среды, содержащие углерод, азот, кислород, водород, фосфор, магний, калий, натрий, железо, хлор и серу.

Эти микроорганизмы нуждаются и в некоторых факторах роста, к числу которых относятся соединения, родственные витаминам группы В, биотин, никотин, рибофлавин и др.

Все эти факторы входят в состав применяемых для культивирования микобактерии туберкулеза специальных питательных сред, из них выделяют среды, содержащие глицерин, белковые (яичные, сывороточные, картофельные) и безбелковые (синтетические) среды, в состав которых входят минеральные соли.

По консистенции различают плотные, полужидкие и жидкие среды. Наиболее широко применяются плотные яичные среды Левенштейна—Йенсена, Огавы, Петраньяни и Гельбера, разнообразные агаровые среды Миддбрука, синтетические и полусинтетические среды Сотона, Дюбо, Проскауэра—Гека, Шулы, Школь-никовой и др.

При внутриклеточном развитии микобактерии, а также при культивировании их на жидких средах хорошо выделяется характерный корд-фактор (трегалоза-6,6-димиколат).

Он обнаруживается на поверхности клеток многих микобактерии и, по мнению некоторых исследователей, имеет отношение к их вирулентности, способствуя сближению микробных клеток и росту их в виде серпантинообразных кос.

На плотных средах микобактерии туберкулеза растут в виде светло-кремового морщинистого или суховатого чешуйчатого налета, образуют колонии с неровными краями, приподнятые в центре, по мере роста они приобретают бородавчатый вид, напоминающий цветную капусту.

Под влиянием антибактериальных веществ микобактерии туберкулеза могут приобретать лекарственную устойчивость. Культуры таких микобактерии не всегда типичны, они могут быть влажными, мягкими (S-вариант), иногда содержать отдельные гладкие или пигментированные колонии.

Лекарственная устойчивость микобактерий туберкулеза – современные взгляды на проблему

О.А. Воробьева (Иркутский институт усовершенствования врачей)

Российская Федерация относится к числу стран с высоким уровнем заболеваемости туберкулезом, хотя с 2003 года стала отмечаться некоторая тенденция к стабилизации эпидемической ситуации.

Наиболее неблагополучной по туберкулезу была в 1999 году территория Западной Сибири, где показатели заболеваемости занимали первое место среди всех субъектов России.

Неуклонный рост показателей заболеваемости туберкулезом представляет значительную угрозу для общества.

Однако еще более серьезной для современной фтизиатрии является проблема лекарственной устойчивости (ЛУ) возбудителя туберкулеза, поскольку является одним из факторов, ограничивающих эффективность антибактериальной терапии. Лекарственная устойчивость — природная или приобретенная способность возбудителя заболевания сохранять жизнедеятельность при воздействии на него лекарственных препаратов.

Согласно классификации ВОЗ (1998), микобактерии туберкулеза (МБТ) могут быть:

• монорезистентные — устойчивые к одному противотуберкулезному препарату;
• полирезистентные — к двум и более противотуберкулезным препаратам (ПТП);
• множественно лекарственно резистентные — устойчивые как минимум к сочетанию изониазида и рифампицина, независимо от наличия или отсутствия устойчивости к другим ПТП.

В международной практике выделяют понятия первичной и вторичной лекарственной устойчивости (ЛУ). В первом случае, это устойчивость, обусловленная инфицированием штаммом микобактерий, выделенных больным с приобретенной устойчивостью. Во втором — устойчивость, возникшая в результате нерациональной химиотерапии.

Выделяют так же понятия «истинной», «ложной», «скрытой» и «полной» лекарственной устойчивости. Истинная резистентность чаще выявляется у постоянных бактериовыделителей. При истинной лекарственной устойчивости одна МБТ устойчива к нескольким антибактериальным препаратам (АБП).

Чаще наблюдается ложная резистентность, когда одни МБТ устойчивы к одним препаратам, а другие— к другим.

Вопрос скрытой лекарственной устойчивости требует дальнейшего изучения. Достоверная идентификация этого вида лекарственной устойчивости возможна лишь при микробиологическом исследовании каверн, т.к.

В настоящее время, когда для лечения применяется много новых резервных препаратов, необходимо помнить о наличии перекрестной лекарственной устойчивости.

Появление первых антибиотико-резистентных штаммов микобактерий туберкулеза (МБТ) связывают с открытием в 1943 г. и широким применением стрептомицина как эффективного противотуберкулезного препарата.

Уже первые системные данные о распространенности первичной лекарственной устойчивости к изониазиду и стрептомицину были получены в 50-е годы за рубежом при проведении эпидемиологических исследований.

Были выделены страны с высоким до 9,4% (Япония и Индия) и низким — от 0,6 до 2,8% (США и Великобритания) уровнем лекарственной устойчивости к этим двум препаратам. При этом показатели устойчивости к стрептомицину были несколько выше устойчивости к изониазиду.

В России подобные исследования по изучению уровня лекарственной устойчивости к стрептомицину, ПАСК, препаратам группы ГИНК стали проводиться с середины 50-х годов Центральным НИИ туберкулеза. Полученные за шестилетний период (1956-1963 гг.

) данные свидетельствовали об изменении за этот период структуры лекарственной устойчивости в сторону уменьшения штаммов МБТ, устойчивых к стрептомицину, и увеличения доли резистентности к препаратам группы ГИНК, а так же к 2 и 3 препаратам одновременно.

Открытие и внедрение в практику новых противотуберкулезных препаратов (в 50-х годах — препараты группы ГИНК, пиразинамид, циклосерин, этионамид, канамицин и каприомицин; в 60-х — рифампицин и этамбутол; в 80-х — препараты группы фторхинолонов), а так же использование схем химиотерапии, включающих одновременное применение 4-5 ПТП, позволяло хотя бы временно решать проблему лекарственной устойчивости. Возможно, поэтому до конца 80-х годов суммарные показатели лекарственной устойчивости в России сохранялись на относительно невысоком уровне, а ее колебания были незначительными.

Крупномасштабное изучение тенденции развития лекарственной устойчивости в России за 20-летний период (1979-1998 гг.) к ПТП показало, что самый высокий уровень ЛУ за эти годы был зарегистрирован к стрептомицину (37%) и изониазиду (34%).

Несколько ниже были показатели устойчивости к рифампицину (21%), канамицину (19%), этионамиду и этамбутолу (16%). Самый низкий уровень лекарственной устойчивости наблюдался к ПАСК (8%).

Синтезированный одним из последних, этамбутол оставался наиболее «надежным» препаратом, к которому резистентность возбудителя держалась на относительно невысоком уровне.

Анализ данных лекарственной устойчивости к стрептомицину, изониазиду, рифампицину и этамбутолу (1991-2001 гг.

), проводимый на Северо-Западе России, показал, что уровень устойчивости к последнему за этот период вырос более чем в 2 раза, хотя и продолжает оставаться ниже по сравнению с остальными препаратами.

Уровень устойчивости к рифампицину лишь немногим уступает устойчивости изониазиду, а частая ассоциация лекарственной устойчивости этих двух препаратов делает рифампицин маркером множественной лекарственной устойчивости (МЛУ).

Являясь одним из основных препаратов, воздействующих на активно размножающуюся фракцию МБТ, рифампицин входит в состав всех схем химиотерапии, применяемых для лечения вновь выявленных больных активным туберкулезом, что делает особенно актуальной проблему мультирезистентности.

Обсуждаются тревожные данные о вспышках мультирезистентного туберкулеза в тесных коллективах. С увеличением МЛУ связывают рост смертности от туберкулеза в мире.

Наряду с этим имеются сведения о том, что больные, выделяющие микобактерии, устойчивые к изониазиду и рифампицину, являются менее заразными, чем другие пациенты.

Рост общей частоты лекарственной устойчивости, наблюдаемый при всех локализациях туберкулеза, сопровождается значительным утяжелением ее структуры за счет снижения монорезистентности и увеличения количества полирезистентных форм.

Уже с конца 90-х годов отмечено отчетливое увеличение удельного веса показателя первичной лекарственной устойчивости от 18 до 61% по различным регионам России, показатели же вторичной лекарственной устойчивости практически повсеместно превышают 50-70, достигая в отдельных областях до 80-86%.

Резистентность МБТ к основным препаратам более характерна для впервые выявленных больных с ограниченной распространенностью процесса. Развитие резистентности МБТ к сочетанию основных и резервных препаратов — для рецидивов и хронического течения туберкулеза легких.

Частота встречаемости МЛУ у вновь выявленных больных являются невысокой (2-10%), поэтому не может оказывать серьезного влияния на основные эпидемиологические показатели по туберкулезу. Большее эпидемиологическое значение имеет вторичная резистентность.

Воздействие противотуберкулезных средств рано или поздно приводит к созданию популяции высокоустойчивых к лекарственному воздействию бактерий.

Существует достаточно большая вероятность того, что массивное лекарственное воздействие не приводит к полной элиминации патогена из организма человека, а является дополнительным фактором его направленной эволюции.

Причины формирования лекарственной устойчивости различны. В индустриально развитых странах это может быть связано с врачебными ошибками при разработке схем лечения; в слаборазвитых — с недостатком финансирования и применением менее эффективных, более дешевых лекарственных препаратов.

Группами риска по формированию лекарственно-устойчивого туберкулеза являются больные, нарушающие режим лечения и прерывающие основной курс лечения самовольно, либо по причине аллергических или токсических осложнений; злоупотребляющие алкоголем, наркотическими средствами; лица, контактирующие с больным туберкулезом, выделяющим лекарственно-устойчивые МБТ.

Лекарственная устойчивость формируется в результате одной или нескольких спонтанных мутаций в независимых генах МБТ, происходящих преимущественно при применении неадекватных схем химиотерапии.

Подобные мутации могут встречаться в микобактериальной популяции еще до контакта МБТ с противотуберкулезными препаратами. Частота возникновения спонтанных мутаций природных штаммов МБТ, влекущих за собой развитие лекарственной устойчивости к антибактериальным препаратам, вариабельна.

В литературе описывается феномен кросс-резистентнтности — состояния, при котором наблюдается лекарственная устойчивость, генетически обусловленная к нескольким препаратам одновременно.

Кросс-резистентность характерна для изониазида и этионамида, рифампицина и его производных, а также стрептомицина, канамицина, амикацина.

Бурное развитие молекулярной генетики, наблюдаемое в последние годы, открыло возможности для изучения генов МБТ, контролирующих лекарственную устойчивость и механизмов ее развития. Наиболее полно изучены гены и механизмы формирования лекарственной устойчивости к препаратам первого ряда.

Устойчивость к изониазиду кодируется несколькими генами: kat G — осуществляет контроль клеточной каталазно-пероксидазной активности; inh A — контроль синтеза миколитических кислот; kas A — контроль протеиновых взаимодействий.

Устойчивость к рифампицину связывают с единственным геном rpo B, контролирующим процесс транскрипции (синтеза РНК). Rps L и rrs — гены, кодирующие процессы трансляции и связанные с синтезом клеточного белка.

Мутации в этих генах являются ключевыми при формировании устойчивости к стрептомицину и канамицину. Устойчивость к этамбутолу кодируется геном emb B, контролирующим процесс нормального построения клеточной стенки при конверсии глюкозы в моносахариды.

Ген pcn A — отвечает за работу фермента энзимпиразимидазы, который осуществляет трансформацию пиразинамида в активный комплекс (пиразинодоновую кислоту).

Влияние характера лекарственной резистентности на течение и исход заболевания является несомненным.

Остро текущие формы туберкулеза легких в большинстве случаев развиваются на фоне множественной лекарственной устойчивости и сопровождаются большой распространенностью специфического и неспецифического воспаления в легочной ткани, отставанием темпов репарации очагов поражения и значительными нарушениями в иммунном статусе. Наличие резистентности к 1-2 препаратам практически не отражается на результатах лечения. Устойчивость к 3 и более препаратам, а особенно МЛУ, затрудняет процесс лечения и снижает его эффективность. Это выражается в замедлении темпов негативации мокроты, рассасывания инфильтративных и ликвидации деструктивных изменений, в связи с чем, наблюдается большая нуждаемость в хирургическом лечении.

Проблема повышения эффективности профилактических мероприятий, для предотвращения заражения лекарственно-устойчивым туберкулезом вызывает широкий интерес. Заболеваемость туберкулезом контактных лиц в семьях больных, выделяющих лекарственно-устойчивые штаммы МБТ, в 2 раза выше по сравнению с заболеваемостью контактов в семьях бактериовыделителей лекарственно-чувствительных МБТ.

Предпринимаются попытки совершенствования профилактических и лечебных мероприятий. Подтверждено совпадение спектра лекарственной устойчивости МБТ заболевших из контакта детей и взрослых с источником инфекции.

Предпринимаются попытки разработки модели больного с лекарственно-устойчивым туберкулезом легких. Получен тренд линейности между возрастом и резистентностью.

Дальнейшее изучение проблемы лекарственной устойчивости создает перспективные возможности для ограничения туберкулезной инфекции.

2008 г.

Устойчивость микобактерий туберкулеза во внешней среде

Микобактерий туберкулеза обладают значительной устойчивостью во внешней среде. При нагревании до 60°С микобактерий погибают через 30 мин, до 70°С — через 20 мин, а при 80°С — через 5 мин. Кипячение убивает ее через нескольких минут.

Сухой горячий воздух при 100°С действует на микобактерий менее активно и убивает их только через 1 час.

Капли аэрозоля, содержащие МВТ, оседают из воздуха на поверхность стола, по­ла, стен и смешиваются с пылью. Такие частицы значительно крупнее инфекцион­ных ядер, но могут подниматься в воздух при конвенции и быть распространителями инфекции.

В высохшей мокроте больного туберкулез МВТ могут сохраняться до 10 мес, а в той же мокроте, но хранящейся в темноте, сохраняются 1-3 года. Проверьте свои знания, пройдите тесты по инфекционным болезням.

Микобактерий туберкулеза в зобе комнатной мухи выживают в течении — 16 дней, в испражнениях — 13 дней.

К низким температурам микобактерии туберкулеза малочувствительны При температуре -6°С, -10°С они сохраняют жизнеспособность в течение нескольких не­дель, при температуре -23°С — до 7 лет. МБТ выдерживают даже температуру жид­кого воздуха — 190°С.

Свойство микобактерии сохранять свою жизнеспособность при низких темпера­турах используется на практике при хранении диагностического материала в холо­дильнике и пересылке его в лабораторию в замороженном состоянии.

Заражение микобактериями туберкулеза возможно и алиментарным путем, их главным источником считаются молочные продукты от больного туберкулезом круп­ного рогатого скота. В сыром молоке МБТ выживают до 14-18 дней. При скисании молока микобактерии не погибают, так как обладают значительной кислотоустойчивостью. В масле, сохраняемом на холоде, они не погибают до 10 мес, а в сыре — до 260 дней.

Отмечена высокая устойчивость МБТ и в отношении ряда дезинфицирующих средств. Они остаются жизнеспособными в 5-10% растворе серной и соляной кисло­ты в течение 24 суток. 3% раствор сулемы убивает МБТ в течение 6-10 ч, 10% раствор лизола — 12 ч, 5% раствор фенола — 24 ч.

Значительно активнее по отношению к МБТ действуют хлорсодержащие пре­параты. Так, 1% раствор хлорамина с добавлением 1% раствора хлористого аммония (активированный хлорамин) убивает микобактерии в течение 2 ч.

При хлорирова­нии воды, зараженной микобактериями туберкулеза, 100% бактерицидный эффект достигается дозой 8 мг/л при контакте в течение 1 ч и остаточном хлоре 7 мг/л.

Все вышесказанное необходимо учитывать при организации текущей и заключи­тельной дезинфекции в бытовых очагах туберкулеза и при организации санитарно-эпидемических мероприятий в ПТУ.

Поделитесь ссылкой:

92. Возбудители туберкулеза. Таксономия и характеристика. Условно – патогенные микобактерии. Микробиологическая диагностика туберкулеза

Туберкулез—хроническоезаболевание человека, сопровождающеесяпоражением органов дыхания, лимфатичес­кихузлов, кишечника, костей и суставов,глаз, кожи, почек и мочевыводящих путей,половых органов, центральной нервнойсистемы.

Болезньвызывается 3 видами микобактерий:Mycobacteriumtuberculosis— человеческий вид, Mycobacteriumbovis— бычий вид, Mycobacteriumafricanum— промежуточный вид.

Таксономия.отдел Firmicutes,род Mycobacterium.Родовой признак — кислото, спирто- ищелочеустойчивость.

Морфология,тинкториальные и культуральные свойства.Выражен­ный полиморфизм. Они имеютформу длинных, тонких (М.tuberculosis)или коротких, толстых (M.

bovis),прямых или слегка изогнутых палочек сгомогенной или зернистой цитоплазмой;грамположительны, неподвижны, спор необразуют, имеют микрокапсулу. Для ихвыявления применяют окраску поЦилю—Нильсену.

Микобактерии могутобразовывать различ­ные морфовары(L-формыбак­терий), которые длительноперсистируют в организме и индуцируютпротивотуберкулезный иммунитет.

Возбудителитуберкулеза характеризуются медленнымростом, требовательны к питательнымсредам. М.tuberculosisотносятся к аэробам, глицеринзависимы.На жидких питательных средах дают роств виде сухой пленки кремового цвета.

При внутриклеточном развитии, а такжепри росте на жидких средах выявляетсяхарактерный корд-фактор, благодарякоторому микобактерии растут в виде«жгутов». На плотных средах рост в видекремового, сухого чешуйчатого налетас неровными краями (R-формы).

tuberculosis,пируватзависимы; на плотных питательныхсредах образуют мелкие шаровидные,серовато-белые колонии (S-формы).

Ферментнаяактивность.Высокая каталазная и пероксидазнаяактивность. Каталаза термолабильна.М.tuberculosisв большом количестве синтезирует ниацин(никотиновая кислота), который накапливаетсяв культуральной среде и определяетсяв пробе Конно.

Химический состав:Основными химическими компо­нентамимикобактерии являются белки, углеводыи липиды.

Липиды (фосфатиды, корд-фактор, туберкулостеариновая кислота) -обусловливают устойчивость к кислотам,спиртам и щелочам, препятствуютфагоцитозу, на­рушают проницаемостьлизосом, вызывают развитие специфи­ческихгранулем, разрушают митохондрии клеток.Микобактерии индуцируют развитиереакции гиперчувствительности IVтипа (туберкулин).

Факторыпатогенности: основныепатогенные свойства обусловлены прямымили иммунологически опосредованнымдействием липидов и липидсодержащихструктур.

Антигеннаяструктура:В ходе забо­левания к антигенамобразуются антипротеиновые, антифосфатидныеи антиполисахаридные антитела,свидетельствующие об активностипроцесса.

Резистентность.Наличие липидов — устойчивы к действиюнебла­гоприятных факторов. Высушиваниемало влияет. Погибают при кипячении.

Эпидемиология.Основной источник инфек­ции — человек,больной туберкулезом органов дыхания,выделяющий микробы в окружающую средус мокротой. Основные пути передачиинфекции — воздушно-капельный ивоздушно-пылевой.

В зоне проникновения микобак­терийвозникает первичный туберкулезныйкомплекс, со­стоящий из воспалительногоочага, пораженных регионарныхлимфатичес­ких узлов и измененныхлимфатических сосудов между ними.Диссеминация микробов может происходитьбронхо-, лимфо- и гематогенно.

Воснове специфического воспаления притуберкулезе лежит реакциягиперчувствительности IVтипа, что препятствует рас­пространениюмикробов по организму.

Различают3 клинические формы: первичная туберкулезнаяинтоксикация у детей и подростков,туберкулез органов дыха­ния, туберкулездругих органов и систем. Основнымисимптомами легочного туберкулезаявляются субфебрильная температуратела, кашель с мокротой, кровохар­канье,одышка.

Иммунитет.Противотуберкулезный иммунитетнестериль­ный инфекционный, обусловленналичием в организме L-форммикобактерий.

Микробиологическаядиагностика.Диагностику проводят с помощьюбактериоскопии, бактериологическогоисследования и постановки биологическойпробы. Все методы направлены на обнаружениемикобактерий в патологическом материале:мокроте, промывных водах бронхов,плевральной и церебральной жидкостях,кусочках тканей из органов.

Кобязательным методам обследованияотносится бактериоскопическое,бактериологическое исследование,биологическая проба, туберкулинодиагностика,основанная на определении повышен­нойчувствительности организма к туберкулину.

Чаще для вы­явления инфицирования иаллергических реакций ставят внутрикожнуюпробу Манту с очищенным туберкулиномв стандартном разведе­нии. Дляэкспресс-диагностики туберкулезаприменяют РИФ(реакция иммунофлюоресенции) и ПЦР(полимеразная цепная реакция).

Длямассового обследования населения,раннего выявле­ния активных формтуберкулеза можно использоватьИФА(иммуноферментный анализ), на­правленныйна обнаружение специфических антител.

Лечение.По степени эффективности противотуберкулезныепрепараты делят на группы: группа А —изониазид, рифампицин; группа В —пиразинамид, стрептомицин, флоримицин;группа С – ПАСК, тиоацетозон. При наличиисопутствую­щей микрофлоры и множественнойлекарственной устойчивости микобактерийприменяют фторхинолоны и альдозон.

Условно-патогенныемикобактерии: семейство Mycobacteriaceae,род Mycobacterium.Сходны по биологич. свойствам, ноустойчивы к противотуберкулезнымпрепаратам.

1 группа:медленнорастущие фотохромогенныеM.kansassi,M.marinum– поражения кожи, лимфадениты, инфекциимочеполового тракта.

2 группа:медленнорастущие скотохромогенные:M.scrofulaceum,M.gordonae.

3 группа:медленнорастущие нехромогенные: M.avium,M.gastri.

4 группа:быстрорастущие ското-,фотохромогенные:M.fortuitum,M.chelonei.

Мутация в геноме возбудителя туберкулёза перепрограммирует макрофаги

Подготовил Александр Колесников

Лекарственно-устойчивый туберкулёз (ЛУ-ТБ) характеризуется не только сложностью в подборе терапии. Для заболевших характерна существенно более высокая смертность (более 30%) по сравнению с антибиотикочувствительной формой болезни (менее 10%).

Частично, повышение смертности при ЛУ-ТБ связано с тем, что антибиотики резерва, используемые при его лечении, менее эффективные и более токсичные.

Но оказалось, что некоторые варианты ЛУ-ТБ могут снижать и эффективность защитных систем организма.

В новой работе исследователи обнаружили, что приобретение возбудителем туберкулёза устойчивости к антибиотикам также приводит и к ослаблению иммунного ответа в мышиной модели инфекции.

«Когда бактерии становятся лекарственно-устойчивыми, они меняются физиологически и заставляют иммунную систему вести себя по-иному»,— говорит Шабаана Хадер, адъюнкт-профессор молекулярной биологии из медицинской школы Университета Вашингтона в Сент-Луисе и руководитель исследования.— «Если мы собираемся бороться с туберкулёзом эффективно, то мы должны понять, что лекарственно-устойчивые бактерии делают с иммунной системой такого, чтобы защититься».

Намёки на то, что антибиотикорезистентный возбудитель ТБ может по-иному взаимодействовать с организмом-хозяином, существовали в течение десятилетий. Изредка встречались публикации о том, что ЛУ-ТБ может быть более агрессивным, чем заболевание, вызванное лекарственно-чувствительными бактериями.

Данные, свидетельствующие о правоте этих предположений, опубликованы в журнале Nature Microbiology. Авторы исследования провели сравнительный анализ иммунного ответа мышей, инфицированных лекарственно-чувствительным и мультирезистентным возбудителями туберкулёза.

Иммунный ответ к чувствительному штамму характеризовался выбросом интерлейкина-1 бета макрофагами и повышением эффективности метаболизма аэробного гликолиза клетками иммунной системы.

Однако при инфекции резистентным штаммом картина менялась. Аэробный метаболизм глюкозы активировался в значительно меньшей степени, а вместо продукции интерлейкина-1 бета макрофагами наблюдалось повышение уровня секреции бета-интерферона, которая считается связанной с ослабленным иммунным ответом, а иногда и с ухудшением состояния инфицированного.

Чтобы объяснить, как лекарственно-устойчивый штамм модифицирует иммунный ответ, исследователи проанализировали полиморфизм различных мультирезистентных штаммов с общим генотипом W-Beijing методом полногеномного секвенирования и изучили корреляцию между лекарственно-устойчивыми мутациями и изменениями в иммунном ответе на патоген. Было обнаружено, что замена единственной буквы в гене rpoB, кодирующем β-субъединицу РНК-полимеразы, обуславливающая устойчивость к рифампицину (rpoB-H445Y), была ответственна и за модификацию иммунного ответа. При этом другая мутация rpoB, вызывавшая устойчивость (rpoB-S450L), практически не влияла на иммунный ответ. Исследователи предположили, что в силу значительных структурных изменений, вызываемых rpoB-H445Y, происходит существенное изменение паттерна транскрипции РНК-полимеразы патогена, что и приводит к фенотипу бактерии, эффективно подавляющему защитный иммунный ответ.

Возможный механизм подавления иммунного ответа штаммом с мутацией rpoB-H445Y, авторы связывают с изменениями в биосинтезе липидных компонентов сложной клеточной стенки микобактерий, в первую очередь фитиоцерол димикоцеросата (PDIM), который, как было показано ранее, играет важнейшую роль в защите патогена от атаки макрофагами. Изменения в структуре транскрипции под действием мутации в rpoB, приводят к количественному и качественному изменению состава этого семейства липидов, приводя, в конечном итоге, к перепрограммированию иммунной реакции клеток хозяина. Это подтверждается тем фактом, что полистирольные микросферы, покрытые очищенным PDIM из мутантного штамма rpoB-H445Y, были способны вызывать секрецию бета-интерферона и супрессию аэробного метаболизма глюкозы так же, как и сами мутантные бактерии.

В силу медленного роста и наличия мощной защитной оболочки, патоген поддается лечению только при использовании комбинации из четырёх антибиотиков, применяемых в течение полугода. Поэтому усиление иммунного ответа может придать второе дыхание продолжительному терапевтическому процессу.

Клинические испытания, призванные понять, могут ли иммуномодуляторы повысить эффективность антибиотикотерапии, уже проводятся. Однако ввиду опасности работы с ЛУ-ТБ, практически все исследования иммуномодуляторов проводили на антибиотикочувствительных штаммах.

Новые данные говорят о том, что иммуномодуляторы, разработанные для лекарственно-чувствительных бактерий, могут и не помочь пациентам, инфицированным ЛУ-ТБ.

«Нам нужно знать, на какие пути в иммунной системе нацеливаться», — говорит Хадер.— И эти пути могут оказаться различными в лекарственно-чувствительном и лекарственно-устойчивом ТБ.

Мы не знаем достаточно о различиях между устойчивым и чувствительным ТБ для того, чтобы быть уверенным в том, что лекарства и вакцины, которые мы разрабатываем, будут работать.

Мы должны провести такие исследования».

Источник

Цитаты по ньюс-релизу

Условия выживания микобактерии туберкулеза и методы диагностики в организме

Микобактерии туберкулеза (mycobacterium tuberculosis) – это крайне опасные микроорганизмы, которые могут провоцировать заболеваемость как у человека, так и у животных. Данные патогенные микроорганизмы отличаются высокой степенью вирулентности, т.е. способны быстро адаптироваться к неблагоприятным внешним факторам.

Они способны за короткий период приобрести резистентность к использующимся для их подавления антибиотикам. Данный эффект сильно усложняет лечение этой бактериальной инфекции.

Какие бактерии вызывают туберкулез

Классификация группы Mycobacterium включает 74 разновидности микробов. Все они являются одноклеточными микроорганизмами. Многие виды микобактерий являются безопасными для человека. Данные типы обитают в почве и водной среде, но не вызывают заболеваемость людей и домашних животных.

Однако есть и опасные формы микобактерий туберкулеза. Наиболее патогенной считается вид mycobacterium tuberculosis. Другое название этого микроорганизма – палочка Коха. Это бактерии, вызывающие туберкулез у людей и животных.

Примерно 95% случаев заражения микобактериозом вызваны этим микробом.

Еще одной часто встречающейся разновидностью микобактерий выступает mycobacterium bovis. Этот микроорганизм чаще поражает крупный рогатый скот. Данная бактерия туберкулеза называется бычьей. У людей, страдающих туберкулезом, болезнь выявляется в 3-6% случаев. Данные бактерии провоцируют кишечную форму заболевания.

К распространенным разновидностям микобактерии относятся птичий и африканский типы. Они не вызывают заболеваемости у людей, но могут под действием различных неблагоприятных факторов контактировать с человеческим штаммом. Это повышает риск появления высоко патогенных атипичных микобактерий, имеющих устойчивость к препаратам.

Строение

Физиология микобактерий туберкулеза обусловлена крайне простым строением. Эти организмы представляют собой прямые или изогнутые палочки. Их длина достигает примерно 1-10 мкм.

Их ширина не превышает 0,2-0,6 мкм. Оболочка микроорганизма представлена микрокапсулой. Она состоит из фибриллярных структур и мукополисахаридов.

В ней также содержатся факторы вирулентности, отвечающие за изменчивость микобактерий туберкулеза.

Внутри оболочки присутствует цитоплазма. Она отвечает за процесс размножения микобактерий, который протекает путем деления. Внутри микроорганизма присутствует ядерная субстанция.

ДНК микобактерии, представленная набором плазмидов и хромосом, содержится ядре.

Свойства

Бактерии возбудители туберкулеза относятся к грамположительным микроорганизмам. Они являются устойчивыми к кислотной среде. Это свойство микобактерии туберкулеза обусловлено присутствием в клеточной стенке воска. Они могут быть как свободноживущими в окружающей среде, так и вести паразитический образ жизни.

Эти организмы отличаются полиморфизмом. Если бактерия попадает в неблагоприятную среду, она переходит в L-форму. В этом виде организм неактивен, но может пережить влияние различных факторов. При изменении характеристик среды на более благоприятные патогенная микрофлора активизируется. Эти микробы не способны продуцировать споры.

Культуральные свойства

Возбудитель туберкулеза является облигатным аэробом. Активизации деления способствуют следующие условия:

• температура 37-38°C;
• повышенное содержание кислорода:
• уровень рН -7,0-7,2.
• наличие белков и глицерина;
• присутствие железа, магния и других минеральных веществ.

Стимулятором их роста является лецитин. Размножение микроорганизмов происходит путем деления. Культивирование микобактерий туберкулеза проводится на яичных, картофельно-желчных и синтетических средах. Палочка при выращивании в искусственных условиях может образовывать R- и S-колонии.

В каком виде будет формироваться колония, зависит от корд-фактора микроорганизма.

Он обуславливает степень вирулентности. R-колонии отличаются шероховатостью и повышенной изменчивостью. S-колонии гладкие и обладают низкой изменчивостью.

На жидкой питательной среде всего за 5-7 недель микроорганизмы формируют толстую морщинистую пленку.

При проведении экспресс-диагностики применяют метод культивирования на стеклах с использованием жидкой питательной среды. Он позволяет получить результат всего за 2-3 суток.

Биохимические свойства

Туберкулезная бактерия вырабатывает ряд ферментов, в т.ч. эстеразу, аминотрансферазу, трегалозу. Дыхание микроорганизма происходит за счет оксидоредуктазы. Вирулентность микроорганизма связана со способностью выработки пероксидазы и каталазы.

Жизненный цикл микобактерий протекает с продукцией большого количества никотиновой кислоты. Это вещество накапливается в жидкой питательной среде. Из-за этого при добавлении к ней раствора хлорамина Б и цианида калия происходит изменение цвета среды на ярко-желтый.

Туберкулез — не приговор! Наша постоянная читательница порекомендовала действенный метод! Новое открытие! Ученые выявили лучшее средство, которое моментально избавит вас от туберкулеза. 5 лет исследований!!! Самостоятельное лечение в домашних условиях! Тщательно ознакомившись с ним, мы решили предложить его и вашему вниманию. Читать далее >>

Тинкториальные свойства

Для окраски препаратов с возбудителем туберкулеза не применяют анилиновые красители. В данном случае используется метод Циля-Нильсена, предполагающий сернокислое протравливание. При таком подходе в препаратах выявляются ярко-красные палочки, устойчивые к кислотной среде. Они могут располагаться одиночно или скоплениями по 2-3 клеток.

В какой среде выживает

Наличие в микроорганизме липидов обеспечивает ему высокую устойчивость к влиянию различных неблагоприятных факторов. Во внешней среде микобактерии выживают в почве, речной воде, канализационных стоках и других средах.

В условиях падения температуры и влияния других неблагоприятных факторов происходит замедление воспроизведения микобактерий и их переход в L-форму. В мокроте и биологических жидкостях микроорганизм может сохраняться на протяжении длительного времени.

МБТ устойчивы к дезинфицирующим средствам в стандартных концентрациях.

Сколько живет

Продолжительность жизни микобактерий зависит от характеристики питательной среды и внешних факторов.

Жизненный цикл этих бактерий может протекать как внутри организма хозяина, так и в окружающей среде.

При отсутствии доступа прямых солнечных лучей, высокой влажности и комнатной температуре в квартире этот микроорганизм проживет на поверхности предметов на протяжении нескольких месяцев.

В уличной грязи микобактерии нередко живут до 4 месяцев. В условиях речной воды микобактерии сохраняют жизнедеятельность до 7 месяцев. В сточной воде возбудители заболевания туберкулез могут жить около 1,5 лет. В почве они сохраняются до 2 лет. Под прямыми солнечными лучами бактерии сохраняются около 90 минут.

Как передается у людей

Наиболее часто источником распространения микобактерий являются инфицированные люди. В организме больного патогенная микрофлора стремительно размножается. Выделяются контактный и воздушно-капельный пути распространения микобактерий.

Наиболее часто от больного человека инфекция распространяется воздушно-капельным путем. Патогенная микрофлора выделяется при чихании, кашле и при разговоре.

В этом случае в воздух попадает большое количество капелек, в которых присутствуют активные микобактерии.

Инфицирование контактным путем часто происходит при совместном использовании средств личной гигиены, а также зараженных предметов интерьера, одежды, продуктов, воды и т.д.

Вдыхание капелек, содержащих бактерии, и контакт с зараженными предметами не всегда приводит к инфицированию.

В большинстве случаев заражение происходит на фоне длительного контакта с источником инфекции или при наличии сниженного иммунитета.

Исследование на наличие

Использующиеся методы диагностики позволяют выявить наличие туберкулеза до появления выраженных признаков заболевания. Для определения наличия заболевания назначаются:

• общий и биохимический анализы крови;
• исследование микробиологии мокроты;
• проба Манту;
• проба Пирке;
• бронхоскопия;
• бактериологический посев;
• биопсия;
• КТ;
• МРТ.

В процессе диагностики нередко используются новые методы выявления микобактерий туберкулеза. Точные данные позволяют иммунологические и серологические исследования крови и мокроты.

Часто применяется при диагностике ПЦР, квантифероновый тест и ИФА. Для выявления внелегочной формы патологии часто назначается РПГА.

Нередко оцениваются суммарные показатели, полученные при проведении исследований.

Микроскопический метод

Данный метод обнаружения микроорганизмов, вызывающих туберкулез, предполагает исследование под микроскопом мазков мокроты, ликвора и других жидкостей. Материал окрашивается по методу Циля-Нильсена и дальнейшее обрабатывается спиртом и промывается водой.

В обработанном таким способом препарате микобактерии светятся красным цветом.

Данный эффект хорошо виден при рассмотрении препарата люминесцентным микроскопом. Недостатком этого метода диагностики является то, что действует он только при высокой концентрации бактерий в препарате. Если активность микобактерий невелика, положительная реакция не проявляется при проведении окрашивания.

Бактериологический метод

Для выявления микобактерий и их штаммов диагностика дополняется путем проведения бактериологического посева. Данный метод предполагает занесение бактерий в питательную среду.

В дальнейшем емкость перемещается в термостат, где выдерживается при температуре 37°C на протяжении 3-12 недель. Каждый день оценивается активность патогенной микрофлоры. При посеве на кровяной среде удается вырастить культуру быстрее.

Это исследование позволяет выявить чувствительность микроорганизмов к антибиотикам и степень вирулентности.

Биологический метод

Определение микобактерий биологическим методом позволяет быстро получить результат, даже если содержание в материале патогенных микроорганизмов невелико.

Этот способ предполагает введение зараженного материала, полученного от человека, в брюшную полость морской свинки. Всего за 10-12 дней в месте укола формируется уплотнение. В дальнейшем развивается генерализованная форма туберкулеза.

Вызываемая введением зараженного препарата реакция губительна для животного.

Аллергологический метод

Примером этого метода выявления туберкулеза является проба Манту. Это исследование предполагает введение туберкулина в кожу предплечья. При отрицательной реакции след от укола исчезает за 72 часа.

При положительной пробе появляется пятно, достигающее 1,5-2 см в диаметре. Данное исследование не всегда показательно.

Если у человека сильно ослаблен иммунитет, при туберкулезе проба может давать отрицательный результат.

Что убивает

Если иммунная система у человека сильна, она вырабатывает специфические антитела к микобактериям. Они способны уничтожать патогенную микрофлору. Для формирования иммунитета детям делается прививка БЦЖ. Некоторые родители, не имея понятия о важности вакцинации от туберкулеза, отказываются от нее. Палочка Коха быстро погибает под действием:

• ультрафиолета;
• прямых солнечных лучей;
• длительного кипячения.

Поспособствовать гибели бактерий может длительный контакт с хлорсодержащими дезинфицирующими препаратами.

Причины лекарственной устойчивости микобактерий

У патогенной микрофлоры, вызывающей развитие туберкулеза, устойчивость во многом обусловлена генетически заложенной изменчивостью. Высокая вирулентность данного микроорганизма способствует его быстрой адаптации к влиянию возникших неблагоприятных факторов.

Это приводит к тому, что каждое последующее поколение бактерий имеет заложенные механизмы нейтрализации влияния внешних неблагоприятных факторов.

Кроме того, причины множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) микобактерий кроются в нерациональном использовании антибиотиков.